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蛋白酶K

  • 产品简述:
  • 其他名称: Proteinase K from Tritirachium Album ;Proteinase
  • 商品品牌:MP Biomedicals
  • CAS号: 39450-01-6
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    219350480 100mg 660.00 280.00 现货

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商品描述

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其它名称:PROTEINASE K,Endopeptidase K

性状:白色至灰白色粉末 

CAS: 39450-01-6            分子量:~30 kDa

溶解性:溶于水(1mg/ml) 

活性:40.1 mAnson U/mg

比活力:46.0 mAnson U/m

来源:源于白色念球菌

产品描述:蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中活性可被提高,还具有降解天然蛋白质的能力,因而它应用很广泛,包括制备脉冲电泳的染色体DNA,蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。

主要用途:应用范围较广,包括制备脉冲电泳的染色体DNA,蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。

产品优势:

l 极高活性

l DNase,RNase

l 无外切酶活性

使用方法:提取总DNA 方法,仅限参考)

所需试剂

0.15M NaCl 0.1M EDTA 1% SDS NaAc (3M, pH 5.2) 

蛋白酶K溶液20mg/ml (用无菌水配制) 

溶菌酶溶液 50mg/ml (用无菌水配制) 液氮 

实验步骤:

(1)将适量样品(如土壤)装入1.5 ml Eppendorf管;

(2)加入1 ml 0.15M NaCl-0.1M EDTA;

(3)加入溶菌酶(sigma)至终浓度为2mg/ml并置于37℃水浴中温育1h;

(4)反复冻融三(液氮3 min-65℃干热器3min);

(5)分别加入蛋白酶K溶液和SDS至终浓度为0.02和0.5%(wt / vol每100ml 溶液中溶质克数),65℃温育1h;

(6)依次用等体积的酚、酚-氯仿-异戊醇(25:24:1)、氯仿抽提裂解液;

(7)加入1/4体积的NaAc (3M, pH 5.2)和2体积冷的纯乙醇沉淀核酸;-20℃放置1h;

(8) 离心收集12000prm,10min,回收DNA沉淀;

(9)DNA沉淀用70%乙醇和无水乙醇洗涤后风干;

(10)(10)每管加入30-50ulTE(Tris-HCl缓冲液)回溶及电泳检测,-20℃保存。

注:方法较适于提取土壤环境微生物样品的总DNA。因为该法未利用机械力量破碎细胞,因而所提取到的总DNA受机械剪切的程度较少,故用这种方法提出的DNA进行PCR扩增,其产物通常含嵌合体较少 

使用浓度:常用浓度50-100µg/ml,根据具体实验情况确定具体工作浓度。

保存:+4°C干燥保存

备注:本公司所有产品仅限科研使用

官网链接:http://www.mpbio.com/product.php?pid=02193504


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