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B-27 添加剂 50X

  • 产品简述:
  • 其他名称: B27;B-27 Serum-Free Supplement (50X), Liquid
  • 商品品牌:Gibco
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    17504044 10ml 1373.00 980.00 现货

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B-27 Serum-Free Supplement (50X), Liquid


性状:液体

培养细胞类型:神经细胞

其他添加剂:抗氧化混合物,胰岛素,维生素A

产品级别:细胞培养级别

产品描述:

B-27® 添加剂是无血清添加剂,用于海马神经元和其他中枢神经系统(CNS)神经元的生长和保持其短期或长期活性。 B-27® 添加剂是50X 的液体,可以与Neurobasal® 培养基或Neurobasal®-A培养基组合使用,用于神经细胞培养而不需要再添加饲养层细胞。

质量控制检测:

B-27® 添加剂 进行了18天妊娠的原代大鼠(Sprague Dawley) 的胚胎海马神经元生长检测。通过了细菌和真菌的检测. B-27® 也做了1X浓度的内毒素水平测试。

产品组分:

Vitamins

Proteins

Biotin

BSA, fatty acid free Fraction V

DL Alpha Tocopherol Acetate

Catalase

DL Alpha-Tocopherol

Human Recombinant Insulin

Vitamin A (acetate)

Human Transferrin

 

Superoxide Dismutase

Other Components

Corticosterone

L-Carnitine HCl

D-Galactose

Linoleic Acid

Ethanolamine HCl

Linolenic Acid

Glutathione (reduced)

Progesterone

Putrescine 2HCl

Sodium Selenite

T3 (triodo-I-thyronine)

 

主要用途:

B-27® 添加剂适合应用于大多数神经细胞培养。

使用B-27添加剂可以获得产前和胚胎神经元细胞的生存力和长期存活率;获得产后和成熟脑神经元细胞的生存力和长期存活率;提高神经元起源的肿瘤细胞系的活力;有利于大鼠胚胎纹状体和中脑的EGF反应性前体细胞的扩增。

使用方法:

一、培养基制备:

1.Neurobasal ® Medium用于原代神经元的培养,使用该培养基时需要添加GlutaMAX™-I(200mM)和B-27®Supplement(50X)。4℃条件下将B-27过夜。

2.无菌添加GlutaMAX™-I至0.5mM终浓度(2.5 mL / L)加入到培养基中。

3.无菌添加2% B-27®补充剂(20 mL / L)至培养基。备注:剩余的B-27®添加剂可以分装成工作体积,并储存在-20°C至-5°C。 根据需要解冻分装样品。不要将B-27®补充剂解冻两次以上。

4.对于原代大鼠海马神经元培养物,完全Neurobasal培养基(由前述步骤制备)需要额外补充25μM  L-谷氨酸,直到培养第4天。一旦补充,完整的Neurobasal®培养基在2°C至8°C的黑暗条件下保存至多一周。

二、细胞培养方法:

以下方法已经在新鲜分离的18天妊娠大鼠海马和皮质神经元、原代大鼠皮质神经元、原代大鼠海马神经元、神经母细胞瘤细胞系上经过测试。

1.将无菌0.05mg/mL冷多聚-D-赖氨酸以0.15mL / cm2的表面积包被细胞培养表面(德国玻璃或者细胞培养基塑料),室温下孵育1小时;

2.去除多聚-D-赖氨酸溶液,并用无菌蒸馏水冲洗两次(多聚-D-赖氨酸可能会对细胞有毒性,必须彻底冲洗掉),掀开盖子将培养板的各个孔彻底晾干,干燥后立即使用或者可在4℃条件下干燥两周。

3.根据相关实验程序说明分离初级大鼠神经元或解冻冷冻保存的原代大鼠神经元。

4.将细胞在37℃预热的完全Neurobasa培养基上以160个/mm2的密度铺板,如有需要也可自行优化铺板密度。注意:对于海马神经元,使用完全培养基需补充25μML-谷氨酸。

5.36-38℃,5%CO2,潮湿环境下孵育(也可以在9%的氧气加5%CO2空气中孵育)。

6.培养4-24小时后,吸出一半的培养基,并用相同体积的新鲜培养基代替,继续培养。

7.非海马神经元的操作:铺板四天后,从每个孔中吸出一半的培养基并用相同体积的新鲜培养基代替。此后每三天重复一次。

8.海马神经元的操作:铺板三天后,用不含L-谷氨酸的完全培养基取代一半培养基。 此后每三天重复一次。注意:通过加入25μM2-巯基乙醇可改善海马神经元的长期存活。

运输和保存:干冰运输,-20°C 到 -5°C保存,避光。

官网链接:

https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/17504044?ICID=search-product

备注:本公司所有产品仅限科研使用


 images/upload/File/17504044 B27添加剂说明书.pdf

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